狗狗打疫苗还要打什么?
疫苗(Vaccine)是用于预防传染病的有效制剂,分为灭活疫苗和弱毒疫苗两大类。其中灭活疫苗通过杀死病原微生物而获得,对犬的传染性疾病的免疫效果好、安全性高;但缺点是诱导机体产生的抗体主要是消灭失去感染力的病原微生物体内的抗原蛋白,不能引起机体的特异性细胞免疫反应及体液免疫应答。因此,接种疫苗后一段时间内仍然可以发病,而且有时会发生不良反应甚至死亡[1]-[2],同时还需要每隔一定时间加强接种一次才能产生保护性抗体,给养宠家庭带来了极大的负担与困扰。 为此国内外不少学者研究开发出了基因缺失苗或亚单位苗来克服上述难题[3]-[4]-[5]。但是目前我国还没有上市的弱毒疫苗产品和基因缺失苗产品,这给我国养犬业的健康发展带来了严重的阻碍,尤其是近几年狂犬病在我国呈现蔓延之势,使得我国的狂犬病防疫工作面临着巨大的挑战。因此,研制具有自主知识产权的犬用灭活疫苗已经成为当务之急。 为了研制出理想的灭活疫苗,中国农业大学动物医学院在多年研究的基础上于2007年9月建立了一套完整的犬用多联弱毒疫苗的研发平台并申请了国家发明专利(ZL200810039462.6),利用该研发平台制备出的“多联二联活病毒灭活疫苗”已通过中试放大生产,并且获得了国家兽药审评中心颁发的《新药研发报告》及农业部颁发的《临床试验批准文件》号,准备进入临床试验阶段。目前,该多联二联活病毒灭活疫苗已经过严格的质量标准体系考核且各项指标均达到或优于相关国家标准,为该产品的上市提供了保障。
一 多联二联活病毒灭活疫苗的研发思路 在传统灭活疫苗的生产过程中通常将灭活后的病原体与佐剂一起混匀制成疫苗冻干粉针供动物注射使用,这种方法虽然安全高效,但是由于无法使抗原物质完全溶解而影响了免疫效果。此外传统的灭活疫苗在生产前需要先进行培养再灭活,这就给病原菌带来交叉感染的风险。鉴于此,本研究在深入研究病毒培养方法及其生物学特性的基础上,经过反复试验最终确定了一种全新的疫苗研制技术路线——以分离自患病犬的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)和犬冠状病毒(CC)株作为疫苗毒株,首先采用连续传代的方法使病毒株发生突变,使其毒性降低但仍保持较好的免疫原性和复制能力,并将这些变异病毒株分别接种于犬肾细胞的单层传代细胞系(MDCK细胞)上增殖,待细胞出现病变后收集病毒液并在-70℃保存备用,然后再选用无毒力、无致病性、不引起宿主细胞病变、易于培养的犬瘟热病毒(MDV)株作对照,以此为基础配制出犬联苗和二联苗。
由于MDCK细胞本身不会被感染,故这种技术无需灭活就可以保证疫苗的安全性;由于病毒的毒性已大大降低,所以该工艺简单易学、生产成本低,且适合规模化生产。 以上研究成果已被发表在《中国生物工程杂志》2011年第5期第784-788页。